การขยายเซลล์ไฮบริโดมาและสื่อการโคลนย่อย

产品信息 รายละเอียดสินค้า

产品名称

ชื่อสินค้า

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

การขยายเซลล์ไฮบริโดมาและตัวกลางการทำสำเนาย่อย

货号 Cat.No

บีอาร์เอส-MED02

规格

ข้อมูลจำเพาะ

500มล./ชม

500 มล./ขวด

产品组分

ส่วนประกอบ

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

สื่อฐาน DMEM: 80% (ปริมาตร/ปริมาตร)

进口胎牛血清:10%(体积比)

เซรั่มวัวในครรภ์ (FBS นำเข้า): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

ปานกลางปรับอากาศ: 10% (v/v)

ปริมาณ:100 单位/mL

เพนิซิลลิน: 100 U/mL

ขนาด:100 单位/mL

สเตรปโตมัยซิน: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

สารเติมแต่งอื่นๆ: ปัจจัยการเพิ่มจำนวนเซลล์เดี่ยว-และอาหารเสริมโมเลกุลขนาดเล็ก

保存条件

สภาพการเก็บรักษา

-20 องศา 保存,มี效期 18 个月.

เก็บที่อุณหภูมิ -20 องศา อายุการเก็บรักษา 18 เดือน

使用方法

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน

培养基融化:

37 องศา 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表เลดี้后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

การละลายสื่อ:

ละลายตัวกลางในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 37 องศา เช็ดพื้นผิวด้านนอกด้วยเอทานอล 70% แล้วใส่ในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพเพื่อใช้งาน
หมายเหตุ: การปรากฏตัวของวัสดุตกตะกอนสีขาวจำนวนเล็กน้อยหลังจากการละลายเป็นเรื่องปกติ ปล่อยให้ตัวกลางยืนเป็นเวลา 3-5 นาทีเพื่อให้ flocs ตกตะกอน จากนั้นจึงรวบรวมส่วนเหนือตะกอนเพื่อใช้

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,ตัวใหญ่正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

การจัดการ Fusion Wells – เซลล์ที่แข็งแรง:

สำหรับหลุมฟิวชันที่มีเซลล์อยู่ในสภาพดี (เช่น สีกลางปกติหรือสีเหลืองเล็กน้อย เซลล์ที่อยู่ใต้กล้องจุลทรรศน์จะดูมีสุขภาพดี สว่าง และมีขนาดปกติ) ค่อยๆ ปิเปตขึ้นและลงด้วยปลายปิเปตสีเหลือง นับเซลล์และเพลตที่ 0.8–1.5 เซลล์/หลุมในตัวกลาง 200 ไมโครลิตร

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

การจัดการ Fusion Wells – เซลล์ที่ต่ำกว่าปกติ:

สำหรับหลุมฟิวชันที่มีเซลล์อยู่ในสภาพต่ำกว่าปกติ (เช่น มีกรดปานกลาง/เหลือง หรือเซลล์ปรากฏเหี่ยวเฉา มีสีเข้มภายใต้กล้องจุลทรรศน์) มีสองตัวเลือกให้เลือกสำหรับการโคลนย่อยในภายหลัง:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

ตัวเลือกที่ 1: ย้ายเซลล์จากหลุมฟิวชันลงในจาน 24 หลุมที่บรรจุตัวกลางนี้ 1 มล. หลังจากขยายตัว 2–3 วัน ให้นับเซลล์และดำเนินการโคลนย่อยที่ 0.8–1.5 เซลล์/หลุมในตัวกลาง 200 µL ในขั้นตอนนี้ การเพิ่มจำนวนเซลล์เป็นสองเท่านั้นมีจำกัด แต่สภาพของเซลล์ยังดี ทำให้เหมาะสำหรับการโคลนนิ่งย่อย

第2种方式是使用黄枪头吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% CO2静置培养3-4隆取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

ค่อยๆ เอาส่วนลอยเหนือตะกอนออกจากหลุมฟิวชันอย่างระมัดระวังโดยใช้ปิเปตทิปสีเหลือง และเติมตัวกลางสด 200 µL ต่อหลุม ฟักที่อุณหภูมิ 37 องศา 5% CO₂ เป็นเวลา 3–4 ชั่วโมง จากนั้น เก็บตัวอย่างเซลล์ นับจำนวน และดำเนินการโคลนย่อยที่ 0.8–1.5 เซลล์/หลุมในตัวกลาง 200 µL

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

หมายเหตุ: โคลนย่อยที่เพาะเลี้ยงด้วยส่วนขยายเซลล์ไฮบริโดมาและตัวกลางการทำโคลนย่อยมักจะไปถึงขั้นตอนที่เหมาะสมสำหรับการคัดกรองหรือการวิเคราะห์ขั้นปลายในวันที่ 6-8 หลังการโคลนย่อย-