Hybridoma Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 รายละเอียดสินค้า

产品名称

ชื่อสินค้า

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

สื่อผสมและการคัดเลือกไฮบริโดมา (HAT)

货号 Cat.No

บีอาร์เอส-MED01

规格

ข้อมูลจำเพาะ

500มล./ชม

500มล./ขวด

产品组分

ส่วนประกอบ

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

สื่อฐาน DMEM: 80% (ปริมาตร/ปริมาตร)

进口胎牛血清:10%(体积比)

เซรั่มวัวทารกในครรภ์นำเข้า (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

ปานกลางปรับอากาศ: 10% (v/v)

ปริมาณ:100 单位/mL

เพนิซิลลิน: 100 U/mL

ขนาด:100 单位/mL

สเตรปโตมัยซิน: 100 U/mL

次黄嘌呤(ไฮโปแซนทีน):100uM

ไฮโปแซนทีน: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(ไทมิดีน):16uM

ไทมิดีน: 16 ไมโครโมลาร์

กรดอะมิโน(Aminopterin):0.4uM

อะมิโนปเทอริน: 0.4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

สารเติมแต่งอื่นๆ: ไซโตไคน์ต่างๆ (ในปริมาณที่เพียงพอ) และอาหารเสริม

保存条件

สภาพการเก็บรักษา

-20 องศา 保存,มี效期 18 个月.

เก็บที่อุณหภูมิ -20 องศา อายุการเก็บรักษา: 18 เดือน.

使用方法

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน

培养基融化:

37 องศา 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表เลดี้后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 นาที使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

การละลายสื่อ:

ละลายตัวกลางในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 37 องศา เช็ดพื้นผิวด้านนอกด้วยเอทานอล 70% แล้วใส่ไว้ในตู้ปลอดเชื้อเพื่อใช้งาน
หมายเหตุ: การปรากฏตัวของวัสดุตกตะกอนสีขาวจำนวนเล็กน้อยหลังจากการละลายเป็นเรื่องปกติ ปล่อยให้ตัวกลางยืนเป็นเวลา 3-5 นาทีเพื่อให้ flocs ตกตะกอนที่ด้านล่าง จากนั้นจึงรวบรวมส่วนเหนือตะกอนอย่างระมัดระวังเพื่อใช้

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 องศา 5% CO2

การรวมตัวของเซลล์และการเพาะ:

ดำเนินการหลอมเซลล์โดยใช้วิธีทางกายภาพ (อิเล็กโตรฟิวชัน) หรือเคมี (PEG ทั่วไป) วางเซลล์ที่หลอมละลายอีกครั้งในตัวกลางนี้โดยตรงที่ความหนาแน่นและปริมาตรที่เหมาะสม:

อิเล็กโทรฟิวชัน: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ เซลล์/หลุม

ฟิวชัน PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ เซลล์/หลุม
ปริมาตรที่แนะนำ: 200 µL/หลุม ในเพลต 96 หลุม
ฟักที่อุณหภูมิ 37 องศา CO₂ 5% เพื่อการเพาะเลี้ยง

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

การทดแทนปานกลาง:

ในวันที่ 4-8 หลังการหลอมรวม ให้ดำเนินการทดแทนอาหารเลี้ยงเชื้อบางส่วนหรือทั้งหมดตามสถานะการเติบโตของเซลล์

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

การคัดกรองโคลน:

เมื่อโคลนเซลล์ในหลุมถึงขนาดที่เหมาะสม ให้ดำเนินการคัดกรองโคลนเชิงบวก

注意事项

ข้อควรระวัง

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

ผลิตภัณฑ์นี้เป็นพิษและมีไว้สำหรับการคัดเลือกและการเพาะเลี้ยงเซลล์ไฮบริโดมาเท่านั้น จะต้องไม่ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงสัตว์ที่มีชีวิต วัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยโรค หรือการประยุกต์ใช้ในการรักษาโรค

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

ผลิตภัณฑ์นี้เหมาะสำหรับการคัดเลือกและการเพาะเลี้ยงเซลล์ไฮบริโดมาโดยใช้ระบบการคัดเลือก HGPRT ไม่สามารถใช้ได้กับ TK หรือระบบการคัดเลือกอื่นๆ สื่อนี้ไม่สามารถใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่บกพร่อง HGPRT{2}} โดยตรง (เช่น NS1, SP2/0)

本产品为无菌溶液,pH 为 7.2~7.4,取用需在无菌条件下进行.

ผลิตภัณฑ์นี้เป็นสารละลายฆ่าเชื้อที่มีค่า pH 7.2–7.4 การจัดการทั้งหมดจะต้องดำเนินการภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ