วิธีเพิ่มประสิทธิภาพการละลายของเปปไทด์แคตตาล็อก?

เฮ้ ในฐานะซัพพลายเออร์ของแคตตาล็อกเปปไทด์ฉันได้จัดการกับลูกค้าจำนวนมากที่เผชิญกับความท้าทายที่เกี่ยวข้องกับความสามารถในการละลายของเปปไทด์ มันเป็นอาการปวดหัวทั่วไป แต่ไม่ต้องกังวลฉันมาที่นี่เพื่อแบ่งปันเคล็ดลับเกี่ยวกับวิธีการเพิ่มประสิทธิภาพการละลายของเปปไทด์แคตตาล็อก

ก่อนอื่นเรามาเข้าใจกันว่าทำไมความสามารถในการละลายจึงมีความสำคัญ เปปไทด์ใช้ในการใช้งานที่หลากหลายตั้งแต่การวิจัยไปจนถึงการพัฒนาการรักษา หากเปปไทด์ละลายไม่ถูกต้องอาจทำให้การทดลองหรือการรักษาของคุณยุ่งเหยิง ตัวอย่างเช่นในการศึกษาการเพาะเลี้ยงเซลล์เปปไทด์ที่ละลายน้ำได้ไม่ดีอาจไม่ถึงเซลล์เป้าหมายอย่างมีประสิทธิภาพซึ่งนำไปสู่ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง

ปัจจัยที่มีผลต่อความสามารถในการละลายของเปปไทด์

ก่อนที่เราจะดำน้ำในการแก้ปัญหาลองมาดูปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อความสามารถในการละลายของเปปไทด์ หนึ่งในปัจจัยหลักคือองค์ประกอบของกรดอะมิโน เปปไทด์ที่อุดมไปด้วยกรดอะมิโนที่ไม่ชอบน้ำเช่น leucine, isoleucine และ valine มักจะละลายได้น้อยลงในน้ำ ในทางกลับกันเปปไทด์ที่มีกรดอะมิโนที่ชอบน้ำมากเช่นไลซีนอาร์จินีนและกรดกลูตามิกจะละลายได้มากขึ้น

อีกปัจจัยหนึ่งคือความยาวของเปปไทด์ โดยทั่วไปเปปไทด์ที่ยาวกว่าจะละลายได้น้อยกว่าที่สั้นกว่า นี่เป็นเพราะเปปไทด์ที่ยาวขึ้นมีภูมิภาคที่ไม่ชอบน้ำมากขึ้นและมีแนวโน้มที่จะสร้างมวลรวม

ค่า pH ของการแก้ปัญหายังมีบทบาทสำคัญ เปปไทด์มีจุด Isoelectric (PI) ซึ่งเป็นค่า pH ที่มีค่าใช้จ่ายสุทธิเป็นศูนย์ ที่ PI เปปไทด์จะละลายได้น้อยที่สุดและมีแนวโน้มที่จะตกตะกอน ดังนั้นการปรับค่า pH ให้ห่างจาก PI สามารถปรับปรุงความสามารถในการละลาย

กลยุทธ์ในการเพิ่มประสิทธิภาพความสามารถในการละลายของเปปไทด์

1. เลือกตัวทำละลายที่เหมาะสม

น้ำมักเป็นตัวเลือกแรกสำหรับการละลายเปปไทด์ แต่อาจไม่ทำงานสำหรับเปปไทด์ทั้งหมด สำหรับเปปไทด์ที่ไม่ชอบน้ำสามารถใช้ตัวทำละลายอินทรีย์เช่น dimethyl sulfoxide (DMSO) หรือ acetonitrile ได้ อย่างไรก็ตามระวังเมื่อใช้ตัวทำละลายอินทรีย์เนื่องจากอาจเป็นพิษต่อเซลล์และอาจส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของเปปไทด์ เป็นความคิดที่ดีที่จะเริ่มต้นด้วยตัวทำละลายอินทรีย์จำนวนเล็กน้อยแล้วเจือจางด้วยน้ำ

ตัวอย่างเช่นหากคุณทำงานกับเปปไทด์ที่ไม่ชอบน้ำเช่นสาร P (9-11)คุณอาจลองละลายในปริมาณ DMSO เล็กน้อยก่อนแล้วจึงเจือจางด้วยน้ำให้มีสมาธิที่ต้องการ

2. ปรับค่า pH

ดังที่ได้กล่าวไว้ก่อนหน้านี้การปรับค่า pH สามารถปรับปรุงความสามารถในการละลายของเปปไทด์ได้อย่างมีนัยสำคัญ คุณสามารถใช้บัฟเฟอร์เพื่อควบคุมค่า pH สำหรับเปปไทด์ที่เป็นกรดให้ใช้บัฟเฟอร์พื้นฐานเช่นโซเดียมไฮดรอกไซด์ (NaOH) เพื่อเพิ่มค่า pH สำหรับเปปไทด์พื้นฐานให้ใช้บัฟเฟอร์ที่เป็นกรดเช่นกรดไฮโดรคลอริก (HCl) เพื่อลดค่า pH

เมื่อปรับค่า pH สิ่งสำคัญคือต้องค่อยๆทำและตรวจสอบความสามารถในการละลาย คุณสามารถใช้เครื่องวัดค่า pH เพื่อให้แน่ใจว่าค่า pH อยู่ในช่วงที่ต้องการ

3. ใช้ผงซักฟอก

ผงซักฟอกสามารถช่วยละลายเปปไทด์ที่ไม่ชอบน้ำโดยการลดแรงตึงผิวและป้องกันการรวมตัวของเปปไทด์ ผงซักฟอกทั่วไปที่ใช้สำหรับการละลายเปปไทด์ ได้แก่ Tween 20, Triton X-100 และ SDS อย่างไรก็ตามโปรดทราบว่าผงซักฟอกอาจส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของเปปไทด์และอาจรบกวนการตรวจบางอย่าง ดังนั้นใช้ด้วยความระมัดระวังและเพิ่มประสิทธิภาพความเข้มข้น

4. sonication

Sonication เป็นเทคนิคที่ใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเพื่อสลายการรวมตัวของเปปไทด์และปรับปรุงความสามารถในการละลาย คุณสามารถใช้ sonicator เพื่อโซลูชันเปปไทด์ในช่วงเวลาสั้น ๆ อย่างไรก็ตามระวังอย่าให้เกินความจริงเนื่องจากสามารถทำลายเปปไทด์ได้

5. เพิ่มตัวแทน chaotropic

ตัวแทน Chaotropic เช่นยูเรียและกัวนิดีนไฮโดรคลอไรด์สามารถขัดขวางปฏิสัมพันธ์ที่ไม่ใช่โควาเลนต์ระหว่างโมเลกุลเปปไทด์และปรับปรุงความสามารถในการละลาย พวกเขาทำงานโดย denaturing โครงสร้างเปปไทด์และป้องกันการรวมตัว อย่างไรก็ตามเช่นเดียวกับผงซักฟอกตัวแทน chaotropic ยังสามารถส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของเปปไทด์ดังนั้นใช้พวกเขาเมื่อจำเป็นเท่านั้น

กรณีศึกษา

ลองมาดูตัวอย่างในโลกแห่งความเป็นจริงของการเพิ่มประสิทธิภาพการละลายของเปปไทด์

กรณีที่ 1:เมทริกซ์โปรตีน M1 (58-66) (ไวรัสไข้หวัดใหญ่ A)

ลูกค้ามีปัญหาในการละลายเปปไทด์นี้ในน้ำ เปปไทด์อุดมไปด้วยกรดอะมิโนที่ไม่ชอบน้ำดังนั้นเราจึงแนะนำให้เริ่มต้นด้วย DMSO ในปริมาณเล็กน้อย นอกจากนี้เรายังปรับค่า pH เป็น 8.0 โดยใช้บัฟเฟอร์ Tris หลังจาก sonication เป็นเวลา 5 นาทีเปปไทด์ละลายอย่างสมบูรณ์

กรณีที่ 2:นักวิเคราะห์ A (1-9)

เปปไทด์นี้ค่อนข้างละลายได้ในน้ำ แต่ลูกค้าต้องการเพิ่มความสามารถในการละลายสำหรับการทดลองที่เฉพาะเจาะจง เราแนะนำให้เพิ่ม Tween 20 (0.1%) ในการแก้ปัญหาเล็กน้อย สิ่งนี้ช่วยป้องกันการรวมตัวของเปปไทด์และปรับปรุงความสามารถในการละลาย

บทสรุป

การเพิ่มประสิทธิภาพการละลายของเปปไทด์แคตตาล็อกเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการใช้งานที่ประสบความสำเร็จในการใช้งานต่างๆ โดยการทำความเข้าใจกับปัจจัยที่มีผลต่อความสามารถในการละลายและการใช้กลยุทธ์ที่เหมาะสมคุณสามารถมั่นใจได้ว่าเปปไทด์ของคุณจะละลายอย่างถูกต้องและปฏิบัติตามที่คาดไว้

หากคุณยังคงมีปัญหากับความสามารถในการละลายของเปปไทด์หรือมีคำถามอื่น ๆ เกี่ยวกับเปปไทด์แคตตาล็อกของเราอย่าลังเลที่จะเอื้อมมือออกไป เราอยู่ที่นี่เพื่อช่วยคุณค้นหาโซลูชั่นที่ดีที่สุดสำหรับความต้องการการวิจัยหรือการพัฒนาของคุณ ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิจัยในห้องปฏิบัติการหรือนักพัฒนาที่ทำงานเกี่ยวกับการรักษาใหม่เราสามารถให้เปปไทด์คุณภาพสูงและคำแนะนำจากผู้เชี่ยวชาญ ดังนั้นเรามาเริ่มการสนทนาและดูว่าเราสามารถทำงานร่วมกันได้อย่างไรเพื่อให้บรรลุเป้าหมายของคุณ

การอ้างอิง

• กู๊ดแมน, M. , et al. (2003) "การสังเคราะห์ทางชีวภาพของเปปไทด์และโปรตีน" ในวิชาเคมีผลิตภัณฑ์ธรรมชาติที่ครอบคลุมฉบับที่ 2, pp. 1-37
• Wade, JD, & Tregear, GW (1993) "การสังเคราะห์และการออกแบบเปปไทด์" ในวิธีการในเอนไซม์, ฉบับที่ 221, pp. 1-61
• Fields, GB, & Noble, RL (1990) "การสังเคราะห์เปปไทด์เฟสของแข็งโดยใช้กรดอะมิโน 9-fluorenylmethoxycarbonyl" วารสารนานาชาติของการวิจัยเปปไทด์และโปรตีน, 35 (3), 161-214