แค็ตตาล็อกเปปไทด์มีปริมาณอย่างไร
เฮ้! ฉันเป็นซัพพลายเออร์ของแค็ตตาล็อกเปปไทด์ และวันนี้ฉันอยากจะพูดคุยเกี่ยวกับวิธีการหาปริมาณของเด็กน้อยเหล่านี้ เปปไทด์มีความสำคัญอย่างยิ่งในสาขาต่างๆ ตั้งแต่การวิจัยไปจนถึงการแพทย์ และการได้รับปริมาณที่แม่นยำถือเป็นสิ่งสำคัญ
ก่อนอื่น เรามาพูดถึงสาเหตุที่เราต้องวัดปริมาณแค็ตตาล็อกเปปไทด์กันก่อน เมื่อนักวิจัยหรือบุคลากรทางการแพทย์ใช้เปปไทด์ พวกเขาจำเป็นต้องรู้ว่าพวกเขากำลังทำงานอยู่มากแค่ไหน ไม่ว่าจะเป็นการทดลองในห้องปฏิบัติการ การทดลองทางคลินิก หรือการพัฒนายาใหม่ ปริมาณที่แม่นยำมีความสำคัญ หากคุณใช้น้อยเกินไป ผลลัพธ์ของคุณอาจไม่แม่นยำ และหากคุณใช้มากเกินไป คุณอาจเลอะเทอะทั้งหมดได้
แล้วเราจะทำอย่างไร? มีวิธีการที่แตกต่างกันสองสามวิธี และฉันจะแจกแจงให้คุณทราบ
วิธีหนึ่งที่พบบ่อยที่สุดคือสเปกโทรสโกปี UV - Vis วิธีการนี้ใช้ประโยชน์จากข้อเท็จจริงที่ว่าเปปไทด์ดูดซับรังสีอัลตราไวโอเลตและแสงที่มองเห็นได้ที่ความยาวคลื่นเฉพาะ กรดอะมิโน เช่น ทริปโตเฟน ไทโรซีน และฟีนิลอะลานีน มีคุณสมบัติการดูดซึมบางอย่าง เมื่อเราฉายแสงที่ความยาวคลื่นเฉพาะผ่านสารละลายเปปไทด์ของเรา เราก็สามารถวัดได้ว่าแสงนั้นถูกดูดซับไว้มากน้อยเพียงใด ขึ้นอยู่กับค่าการดูดซึมและค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียที่ทราบของเปปไทด์ (ซึ่งสัมพันธ์กับองค์ประกอบของกรดอะมิโน) เราสามารถคำนวณความเข้มข้นของเปปไทด์ในสารละลายได้ เช่น ถ้าเรามีเปปไทด์ที่มีทริปโตเฟนในปริมาณสูง ก็จะดูดซับแสงได้มากขึ้นที่ประมาณ 280 นาโนเมตร เราใช้สูตรง่ายๆ ตามกฎเบียร์ - แลมเบิร์ต เพื่อหาความเข้มข้น เป็นวิธีที่ค่อนข้างง่ายและรวดเร็ว แต่ก็มีข้อจำกัดบางประการ สารปนเปื้อนในสารละลายเปปไทด์ยังสามารถดูดซับแสงที่ความยาวคลื่นเท่ากัน ซึ่งทำให้การตรวจวัดของเราผิดพลาดได้
อีกวิธีหนึ่งที่ได้รับความนิยมคือการทดสอบแบบแบรดฟอร์ด นี่คือการทดสอบการวัดสีซึ่งอาศัยสีย้อมที่เรียกว่า Coomassie Brilliant Blue G - 250 เมื่อสีย้อมนี้จับกับเปปไทด์ สีจะเปลี่ยนไป จากนั้นเราสามารถวัดการดูดกลืนแสงของสารละลายสีที่ความยาวคลื่นเฉพาะได้ (ปกติจะอยู่ที่ประมาณ 595 นาโนเมตร) ปริมาณการเปลี่ยนสีเป็นสัดส่วนกับปริมาณเปปไทด์ในสารละลาย เราสร้างกราฟมาตรฐานโดยใช้ความเข้มข้นที่ทราบของเปปไทด์อ้างอิง จากนั้นเปรียบเทียบการดูดกลืนแสงของตัวอย่างเปปไทด์ที่ไม่รู้จักกับกราฟนั้นเพื่อกำหนดความเข้มข้น การทดสอบแบบแบรดฟอร์ดค่อนข้างละเอียดอ่อน แต่อาจได้รับผลกระทบจากสารบางชนิดในตัวอย่าง เช่น ผงซักฟอกหรือเกลือ
HPLC หรือโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงยังใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการวัดปริมาณเปปไทด์ ใน HPLC เราแยกเปปไทด์ออกจากส่วนประกอบอื่นๆ ในตัวอย่างตามคุณสมบัติทางเคมีของเปปไทด์ เช่น การไม่ชอบน้ำ เราฉีดสารละลายเปปไทด์ลงในคอลัมน์ที่เต็มไปด้วยเฟสคงที่ จากนั้นใช้เฟสเคลื่อนที่ (ตัวทำละลายของเหลว) เพื่อดันเปปไทด์ผ่านคอลัมน์ เปปไทด์ที่แตกต่างกันจะเคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์ในอัตราที่ต่างกัน และเราสามารถตรวจจับพวกมันได้ในขณะที่พวกมันออกมาจากคอลัมน์โดยใช้เครื่องตรวจจับ ซึ่งโดยปกติแล้วจะเป็นเครื่องตรวจจับรังสียูวี เมื่อเปรียบเทียบพื้นที่พีคของเปปไทด์ที่เราสนใจกับพื้นที่พีคของมาตรฐานที่ทราบ เราก็สามารถคำนวณความเข้มข้นได้ HPLC ดีมากเพราะสามารถแยกและวัดปริมาณเปปไทด์ได้แม้ในส่วนผสมที่ซับซ้อน แต่ใช้เวลานานกว่าเล็กน้อยและต้องใช้อุปกรณ์พิเศษ
ตอนนี้ เรามาพูดถึงแค็ตตาล็อกเปปไทด์ที่เรานำเสนอกันสักหน่อย เอาEntero-Hylambatinตัวอย่างเช่น. เมื่อเราหาปริมาณเปปไทด์นี้ เราจะใช้วิธีการเหล่านี้ร่วมกันเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำที่สุด ขั้นแรกเราใช้สเปกโทรสโกปี UV - Vis เพื่อประมาณความเข้มข้นคร่าวๆ จากนั้นตรวจสอบอีกครั้งด้วย HPLC ด้วยวิธีนี้ เราจึงสามารถอธิบายการปนเปื้อนหรือการรบกวนที่อาจเกิดขึ้นในตัวอย่างได้
อีกอันหนึ่งก็คืออี[ค(RGDyK)]2- เปปไทด์นี้มีคุณสมบัติพิเศษบางประการ และเราจำเป็นต้องระมัดระวังเป็นพิเศษในการหาปริมาณ การทดสอบแบบแบรดฟอร์ดอาจไม่ใช่ตัวเลือกที่ดีที่สุดที่นี่ เนื่องจากมีองค์ประกอบของกรดอะมิโนจำเพาะ ดังนั้นเราจึงพึ่งพา HPLC และ UV - Vis spectroscopy มากขึ้น
แล้วก็มีมาซดูไทด์ (Lys20(N₃-CH₂CO-))- นี่เป็นเปปไทด์ที่ซับซ้อนกว่า และเราใช้แนวทางแบบหลายขั้นตอน เราเริ่มต้นด้วย UV - Vis เพื่ออ่านค่าเบื้องต้น จากนั้นใช้ HPLC เพื่อแยกสารออกจากสิ่งเจือปนใดๆ และรับปริมาณที่แม่นยำยิ่งขึ้น
ที่บริษัทของเรา การควบคุมคุณภาพถือเป็นเรื่องใหญ่ เราตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ปฏิบัติตามระเบียบการที่เข้มงวดเมื่อตรวจวัดปริมาณแค็ตตาล็อกเปปไทด์ของเรา เราทำการทดสอบหลายครั้งในแต่ละชุด และเปรียบเทียบผลลัพธ์ของเรากับวัสดุอ้างอิงที่ได้รับการรับรองเพื่อให้มั่นใจในความถูกต้อง นอกจากนี้เรายังเก็บบันทึกโดยละเอียดของข้อมูลปริมาณทั้งหมด เพื่อให้ลูกค้าของเรามีความมั่นใจอย่างเต็มที่ในเปปไทด์ที่พวกเขาซื้อ
หากคุณอยู่ในตลาดสำหรับแค็ตตาล็อกเปปไทด์คุณภาพสูงและต้องการปริมาณที่แม่นยำ เราพร้อมให้ความช่วยเหลือ ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิจัยที่กำลังมองหาเปปไทด์สำหรับการทดลองครั้งใหญ่ครั้งต่อไปของคุณ หรือบริษัทยาที่กำลังพัฒนายาตัวใหม่ เรามีเปปไทด์ที่คุณต้องการ ทีมผู้เชี่ยวชาญของเราพร้อมเสมอที่จะตอบคำถามใดๆ ที่คุณอาจมีเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ของเราหรือกระบวนการวัดปริมาณ ดังนั้น อย่าลังเลที่จะติดต่อและเริ่มการสนทนาเกี่ยวกับความต้องการเปปไทด์ของคุณ เราพร้อมที่จะทำงานร่วมกับคุณเพื่อค้นหาโซลูชันที่ดีที่สุดสำหรับโครงการของคุณ
อ้างอิง
- ขอบเขต, RK (1994) การทำโปรตีนให้บริสุทธิ์: หลักการและการปฏิบัติ สปริงเกอร์.
- สคูก, ดา, เวสต์, DM, ฮอลเลอร์, เอฟเจ, & เคร้าช์, เอสอาร์ (2013) พื้นฐานของเคมีวิเคราะห์ การเรียนรู้แบบ Cengage
- Bollag, DM, Rozycki, MD, และ Edelstein, SJ (1996) วิธีโปรตีน ไวลีย์-ลิส