รีเอเจนต์ transfection ใดที่เหมาะสำหรับ TET - 213?

ในสาขาการวิจัยทางชีวภาพเซลล์ TET - 213 สายได้กลายเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการตรวจสอบการทดลองต่าง ๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับประสาทวิทยาและเนื้องอก ในฐานะซัพพลายเออร์ชั้นนำของเซลล์ TET - 213 เซลล์เราเข้าใจถึงความสำคัญของการเลือกรีเอเจนต์ transfection ที่เหมาะสมสำหรับการส่งยีนที่มีประสิทธิภาพเข้าสู่เซลล์เหล่านี้ โพสต์บล็อกนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสำรวจรีเอเจนต์ transfection ที่เหมาะสำหรับ TET - 213 และให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับข้อดีและข้อ จำกัด ของพวกเขา

ทำความเข้าใจกับ TET - 213 เซลล์

TET - 213 เป็นเซลล์เซลล์ประสาทของมนุษย์ที่ใช้กันทั่วไปในการวิจัยเนื่องจากความสามารถในการแยกความแตกต่างเป็นเซลล์ประสาท - เช่นเซลล์ เซลล์เหล่านี้มาจากเนื้องอก neuroblastoma และรักษาลักษณะหลายอย่างของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท คุณสมบัติที่เป็นเอกลักษณ์ของพวกเขาทำให้พวกเขามีค่าสำหรับการศึกษาการพัฒนาของเซลล์ประสาทการทำงานและการเกิดโรคของโรคทางระบบประสาท การถ่ายยีนจากภายนอกใน TET - 213 เซลล์สามารถช่วยให้นักวิจัยเข้าใจการทำงานของยีนกลไกการควบคุมและผลกระทบของโปรตีนที่เฉพาะเจาะจงต่อกระบวนการของเซลล์

ข้อควรพิจารณาที่สำคัญสำหรับการถ่ายเลือดใน TET - 213 เซลล์

ก่อนที่จะเลือกรีเอเจนต์ transfection ต้องพิจารณาปัจจัยหลายอย่าง ประการแรกประสิทธิภาพการถ่ายเลือดเป็นสิ่งสำคัญ การถ่ายเลือดสูง - ประสิทธิภาพทำให้มั่นใจได้ว่าสัดส่วนของเซลล์ส่วนใหญ่จะใช้ DNA หรือ RNA ภายนอกซึ่งช่วยให้สามารถแสดงออกของยีนเป้าหมายได้อย่างแข็งแกร่ง ประการที่สองความมีชีวิตของเซลล์จะต้องได้รับการบำรุงรักษาหลังจากการถ่ายเลือด รีเอเจนต์ transfection บางตัวอาจเป็นพิษต่อเซลล์นำไปสู่การตายของเซลล์หรือพฤติกรรมของเซลล์ที่ผิดปกติ ประการที่สามชนิดของกรดนิวคลีอิกที่ถูกถ่าย (DNA, RNA หรือ oligonucleotides) และขนาดของมันยังมีผลต่อการเลือกของรีเอเจนต์ transfection

รีเอเจนต์ transfection เหมาะสำหรับ TET - 213 เซลล์

รีเอเจนต์ transfection ตามไขมัน

รีเอเจนต์ transfection ที่ใช้ไขมันเป็นหนึ่งในตัวแทนการถ่ายเลือดที่ใช้กันมากที่สุด พวกมันทำงานโดยการสร้างไลโปโซมที่ห่อหุ้มกรดนิวคลีอิกและฟิวส์ด้วยเยื่อหุ้มเซลล์ทำให้กรดนิวคลีอิกเข้าสู่เซลล์ Lipofectamine 2000 เป็นรีเอเจนต์การถ่ายไขมันที่รู้จักกันดีซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการถ่าย TET - 213 เซลล์ มันมีประสิทธิภาพการถ่ายโอนสูงความเป็นพิษค่อนข้างต่ำและเหมาะสำหรับการถ่ายทั้ง DNA และ RNA
กลไกของ lipofectamine 2000 เกี่ยวข้องกับการก่อตัวของ liposomes ที่มีประจุบวกซึ่งมีปฏิสัมพันธ์กับกรดนิวคลีอิกที่มีประจุลบเพื่อสร้าง lipoplexes lipoplexes เหล่านี้จะถูกทำให้เป็นภายในโดยเซลล์ผ่าน endocytosis เมื่ออยู่ในเซลล์กรดนิวคลีอิกจะถูกปล่อยออกมาและสามารถส่งไปยังนิวเคลียสสำหรับการแสดงออกของยีน
lipofectamine 3000 ที่ใช้ไขมันอีกชนิดหนึ่งได้แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่ดีในการถ่าย TET - 213 เซลล์ มันเป็นรุ่นที่ได้รับการปรับปรุงของ Lipofectamine 2000 โดยมีประสิทธิภาพการเปลี่ยนถ่ายที่เพิ่มขึ้นและลดความเป็นพิษ Lipofectamine 3000 ใช้สูตรใหม่ที่ช่วยให้มีปฏิสัมพันธ์กับเยื่อหุ้มเซลล์ของเซลล์ได้ดีขึ้นและการส่งกรดนิวคลีอิกที่มีประสิทธิภาพมากขึ้น

รีเอเจนต์ transfection จากพอลิเมอร์

รีเอเจนต์ transfection จากพอลิเมอร์เป็นอีกทางเลือกหนึ่งสำหรับการถ่าย TET - 213 เซลล์ Polyethylenimine (PEI) เป็นรีเอเจนต์ที่ใช้พอลิเมอร์ที่ใช้กันทั่วไป PEI เป็นพอลิเมอร์ประจุบวกที่สามารถควบแน่นกรดนิวคลีอิกลงในอนุภาคขนาดเล็กและส่งเสริมการดูดซึมของพวกเขาโดยเซลล์ มีรายงานว่ามีประสิทธิภาพในการเปลี่ยนถ่ายสูงในเซลล์ TET - 213 เซลล์โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการถ่าย DNA ข้อได้เปรียบของ PEI คือต้นทุนต่ำและใช้งานง่าย อย่างไรก็ตามอาจเป็นพิษต่อเซลล์ที่มีความเข้มข้นสูงดังนั้นจึงจำเป็นต้องเพิ่มประสิทธิภาพการถ่ายเลือดอย่างระมัดระวัง
Jetpei เป็นรีเอเจนต์ transfection ที่ใช้พอลิเมอร์เชิงพาณิชย์ซึ่งได้รับการออกแบบมาเพื่อลดความเป็นพิษในขณะที่ยังคงรักษาประสิทธิภาพการถ่ายโอนสูง มันถูกนำมาใช้อย่างประสบความสำเร็จในการถ่าย TET - 213 เซลล์ให้ความสมดุลที่ดีระหว่างประสิทธิภาพการถ่ายเลือดและความมีชีวิตของเซลล์

เวกเตอร์ transfection จากไวรัส

เวกเตอร์ที่ใช้ไวรัสยังใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการส่งยีนไปยังเซลล์ TET - 213 เซลล์ เวกเตอร์ Adenovirus เป็นที่รู้จักกันดีในเรื่องประสิทธิภาพการถ่ายโอนที่สูงและความสามารถในการติดเชื้อทั้งการหารและไม่แบ่งเซลล์ พวกเขาสามารถมี DNA จากภายนอกได้ค่อนข้างมากและให้การแสดงออกของยีนที่แข็งแกร่งและยั่งยืน อย่างไรก็ตามการผลิตเวกเตอร์ adenovirus มีความซับซ้อนและเวลามากขึ้น - การบริโภคเมื่อเทียบกับรีเอเจนต์ transfection ที่ไม่ใช่ไวรัส
เวกเตอร์ Lentivirus เป็นอีกทางเลือกหนึ่ง พวกเขาสามารถรวม DNA ภายนอกเข้ากับจีโนมเซลล์โฮสต์ทำให้เกิดการแสดงออกของยีนที่เสถียร เวกเตอร์ Lentivirus เหมาะสำหรับการศึกษาระยะยาวในเซลล์ TET - 213 เซลล์เช่นการสร้างเซลล์ที่มีเสถียรภาพ อย่างไรก็ตามพวกเขายังต้องการการจัดการพิเศษเนื่องจากความเสี่ยงทางชีวภาพที่อาจเกิดขึ้น

การเปรียบเทียบรีเอเจนต์ transfection สำหรับ TET - 213 เซลล์

เมื่อเปรียบเทียบรีเอเจนต์ transfection ที่แตกต่างกันเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องพิจารณาประสิทธิภาพของพวกเขาในแง่ของประสิทธิภาพการถ่ายเลือดความเป็นไปได้ของเซลล์ความสะดวกในการใช้งานและค่าใช้จ่าย รีเอเจนต์ที่ใช้ไขมันเช่น lipofectamine 2000 และ 3000 นั้นใช้งานง่ายและมีประสิทธิภาพการเปลี่ยนถ่ายสูงพร้อมความมีชีวิตของเซลล์ที่ยอมรับได้ พวกเขาเหมาะสำหรับการทดลองทั้งระยะสั้นและระยะยาว พอลิเมอร์ - รีเอเจนต์ที่ใช้ PEI และ Jetpei มีค่าใช้จ่าย - มีประสิทธิภาพและสามารถบรรลุประสิทธิภาพการถ่ายเลือดที่ดี แต่จำเป็นต้องเพิ่มประสิทธิภาพความเป็นพิษ เวกเตอร์ที่ใช้ไวรัสนำเสนอการส่งยีนที่มีประสิทธิภาพสูงและการแสดงออกที่มั่นคง แต่ต้องการอุปกรณ์พิเศษและข้อควรระวังด้านความปลอดภัย

การประยุกต์ใช้ TET transfected - 213 เซลล์

เมื่อได้รับการถ่ายโอนสำเร็จแล้ว TET - 213 เซลล์สามารถใช้ในการใช้งานที่หลากหลาย ตัวอย่างเช่นในการศึกษาฟังก์ชั่นของยีนสามารถใช้เซลล์ transfected เพื่อตรวจสอบบทบาทของยีนที่เฉพาะเจาะจงในการพัฒนาและการทำงานของเซลล์ประสาท โดยการแสดงออกมากเกินไปหรือล้มยีนโดยเฉพาะนักวิจัยสามารถสังเกตการเปลี่ยนแปลงของสัณฐานวิทยาของเซลล์การปลดปล่อยสารสื่อประสาทและเส้นทางการส่งสัญญาณ
ในการค้นพบยา transfected TET - 213 เซลล์สามารถใช้เป็นรูปแบบการคัดกรองเพื่อระบุตัวแทนการรักษาที่มีศักยภาพ ยกตัวอย่างเช่นยีนที่เกี่ยวข้องกับโรคทางระบบประสาทสามารถถ่ายโอนเข้าไปในเซลล์จากนั้นเซลล์สามารถได้รับการรักษาด้วยสารประกอบต่าง ๆ เพื่อประเมินผลกระทบที่มีต่อฟีโนไทป์ที่เกี่ยวข้องกับโรค
ยิ่งไปกว่านั้น TET - 213 เซลล์ที่ถ่ายด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนเรืองแสงสามารถใช้สำหรับการศึกษาการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิต สิ่งนี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถสังเกตกระบวนการเซลลูลาร์แบบไดนามิกในเวลาจริง

เปปไทด์ที่เกี่ยวข้องสำหรับการทดลองที่เกี่ยวข้อง

ในการทดลองบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับ transfected TET - 213 เซลล์อาจใช้เปปไทด์เพิ่มเติม ตัวอย่างเช่น,Cyclo (RADFK)-สาร P (9 - 11), และเบต้า - amyloid (1 - 40), มนุษย์สามารถใช้ในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณของเซลล์ประสาทเปปไทด์ - ปฏิกิริยาของตัวรับและโรคทางระบบประสาท เปปไทด์เหล่านี้สามารถช่วยอธิบายกลไกการทำงานของเซลล์ประสาทและการพัฒนาโรคต่อไป

บทสรุป

การเลือกรีเอเจนต์ transfection ที่เหมาะสมสำหรับ TET - 213 เซลล์เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการส่งมอบยีนที่ประสบความสำเร็จและการศึกษาทดลองที่ตามมา lipid - lipid - โพลิเมอร์ - อิงและรีเอเจนต์การถ่ายเลือดตามไวรัสแต่ละตัวมีข้อได้เปรียบและข้อ จำกัด ของตัวเอง นักวิจัยควรพิจารณาข้อกำหนดเฉพาะของการทดลองอย่างรอบคอบเช่นประสิทธิภาพการถ่ายเลือดความมีชีวิตของเซลล์และชนิดของกรดนิวคลีอิกที่ถูกถ่ายเมื่อเลือกรีเอเจนต์ transfection
ในฐานะซัพพลายเออร์ของ TET - 213 เซลล์เรามุ่งมั่นที่จะให้เซลล์ที่มีคุณภาพสูงและให้คำแนะนำเกี่ยวกับแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์และการถ่ายเลือด หากคุณมีความสนใจในการซื้อ TET - 213 เซลล์สำหรับการวิจัยของคุณหรือมีคำถามเกี่ยวกับรีเอเจนต์ transfection และการทดลองที่เกี่ยวข้องโปรดติดต่อเราเพื่อขอข้อมูลเพิ่มเติมและเพื่อหารือเกี่ยวกับโอกาสการทำงานร่วมกันที่อาจเกิดขึ้น

การอ้างอิง

1. Sambrook, J. , & Russell, DW (2001) การโคลนนิ่งโมเลกุล: คู่มือห้องปฏิบัติการ สำนักพิมพ์ห้องปฏิบัติการ Cold Spring Harbour
2. Chen, C. , & Okayama, H. (1987) การเปลี่ยนแปลงประสิทธิภาพสูงของเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมโดยพลาสมิดดีเอ็นเอ ชีววิทยาโมเลกุลและเซลลูลาร์, 7 (8), 2745 - 2752
3. Amara, F. , Rehem, A. , & Galy, A. (2016) การทบทวนวิธีการถ่ายโอนปัจจุบันและระบบการจัดส่ง วารสารเภสัชศาสตร์และวิทยาศาสตร์ชีวภาพ 8 (3), 181 - 187