เฮ้! ในฐานะซัพพลายเออร์ของ Tet - 213 เซลล์ ฉันตื่นเต้นอย่างยิ่งที่จะแบ่งปันวิธีการคัดกรองแอปทาเมอร์บนเซลล์ Tet - 213 กับคุณ การคัดกรองแอปทาเมอร์เป็นกระบวนการที่ยอดเยี่ยมที่สามารถช่วยให้เราค้นหาลำดับกรดนิวคลีอิกสั้นพิเศษหรือแอปทาเมอร์ ซึ่งสามารถจับกับเป้าหมายเฉพาะที่มีความสัมพันธ์และความจำเพาะสูง และเมื่อพูดถึง Tet - 213 เซลล์ มันคือโลกใหม่ของความเป็นไปได้!
ก่อนอื่น เรามาพูดถึงเต็ต - 213 เซลล์กันก่อน เซลล์เหล่านี้ค่อนข้างมีเอกลักษณ์เฉพาะตัวและมีการนำไปประยุกต์ใช้ในการวิจัยทางชีววิทยาได้หลากหลาย คุณสามารถหารายละเอียดเพิ่มเติมเกี่ยวกับพวกเขาได้ในเว็บไซต์ของเราเท็ด - 213-
การเตรียมการคัดกรอง Aptamer
ก่อนที่เราจะเข้าสู่กระบวนการคัดกรองจริง เราต้องเตรียมสิ่งต่างๆ ให้พร้อม ขั้นตอนแรกคือการเพาะเลี้ยงเซลล์ Tet - 213 อย่างเหมาะสม คุณต้องแน่ใจว่าพวกมันมีสุขภาพที่ดี และเติบโตได้ดีในอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสม โดยปกติแล้ว เราใช้อาหารเลี้ยงเชื้อเฉพาะที่ให้สารอาหารทั้งหมดที่เซลล์เหล่านี้ต้องการในการเจริญเติบโต
ต่อไปเราต้องเตรียมไลบรารี aptamer เริ่มต้น ห้องสมุดนี้เป็นเหมือนแหล่งรวมขนาดใหญ่ของลำดับกรดนิวคลีอิกที่แตกต่างกัน มันมีผู้ตรวจสอบที่แตกต่างกันนับล้านหรือหลายพันล้านคน โดยแต่ละอันมีลำดับที่ไม่ซ้ำกัน เราจะใช้ห้องสมุดนี้เพื่อเริ่มกระบวนการคัดกรอง
กระบวนการคัดกรอง
ทีนี้ มาดูสาระสำคัญของการคัดกรองแอปทาเมอร์บนเซลล์ Tet - 213 กันดีกว่า วิธีการที่พบบ่อยที่สุดเรียกว่า Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment (SELEX) นี่คือวิธีการทำงานทีละขั้นตอน:
ขั้นตอนที่ 1: การฟักตัว
เราใช้ไลบรารี aptamer และผสมกับเซลล์ Tet - 213 เราปล่อยให้พวกมันฟักตัวในช่วงระยะเวลาหนึ่ง ซึ่งปกติจะใช้เวลาสองสามชั่วโมง ในช่วงเวลานี้ ผู้ตรวจสอบในห้องสมุดจะมีโอกาสเกาะติดกับพื้นผิวของเซลล์ Tet - 213 ผู้ตรวจสอบบางคนจะผูกมัดอย่างแน่นหนา ในขณะที่บางคนจะไม่ผูกเลย
ขั้นตอนที่ 2: การแยก
หลังจากการฟักตัว เราจำเป็นต้องแยกแอปทาเมอร์ที่ผูกไว้กับเซลล์ออกจากตัวที่ไม่ใช่ มีหลายวิธีในการทำเช่นนี้ วิธีการทั่วไปวิธีหนึ่งคือการใช้การหมุนเหวี่ยง เราหมุนส่วนผสมด้วยความเร็วสูง และเซลล์ที่มีแอปทาเมอร์ที่ถูกผูกไว้จะก่อตัวเป็นเม็ดที่ด้านล่างของท่อ ในขณะที่แอปทาเมอร์ที่ไม่ถูกผูกไว้จะยังคงอยู่ในส่วนเหนือตะกอน
ขั้นตอนที่ 3: การชะล้าง
เมื่อเราแยกผู้ตรวจสอบที่ถูกผูกไว้ออกแล้ว เราต้องเอาพวกมันออกจากเซลล์ สิ่งนี้เรียกว่าการชะล้าง เราใช้บัฟเฟอร์พิเศษเพื่อทำลายพันธะระหว่างผู้ตรวจสอบและเซลล์ หลังจากการชะล้าง เรามีชุดแอปทาเมอร์ที่มีความสัมพันธ์กับเซลล์ Tet - 213 ที่สูงกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับไลบรารีดั้งเดิม
ขั้นตอนที่ 4: การขยายเสียง
จำนวนผู้ตรวจสอบที่เราได้รับหลังจากการชะล้างมักจะค่อนข้างน้อย ดังนั้นเราจึงต้องขยายความพวกมัน เราใช้เทคนิคที่เรียกว่า Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR เป็นเหมือนเครื่องถ่ายเอกสารสำหรับ DNA หรือ RNA สามารถสร้างสำเนาของผู้ตรวจสอบได้หลายล้านชุดในเวลาอันสั้น
ขั้นตอนที่ 5: การวนซ้ำ
กระบวนการคัดกรองไม่สิ้นสุดหลังจากหนึ่งรอบ เรามักจะทำซ้ำขั้นตอนการฟักตัว การแยก การชะ และการขยายหลายครั้ง แต่ละรอบเรียกว่ารอบการคัดเลือก ในแต่ละรอบ เราจะเข้าใกล้มากขึ้นเรื่อยๆ เพื่อค้นหาผู้ตรวจสอบที่มีความสัมพันธ์และความจำเพาะสูงสุดสำหรับเซลล์ Tet - 213
การประเมินผู้ตรวจสอบที่เลือก
หลังจากผ่านการคัดเลือกมาหลายรอบ เราก็มีกลุ่มผู้ตรวจสอบที่เราคิดว่าเหมาะสม แต่เราไม่สามารถสรุปได้ว่ามันสมบูรณ์แบบ เราจำเป็นต้องประเมินพวกเขา
วิธีหนึ่งในการประเมินผู้ตรวจสอบคือการวัดความสัมพันธ์ที่มีผลผูกพัน เราสามารถใช้เทคนิคต่างๆ เช่น Surface Plasmon Resonance (SPR) หรือการวัดความร้อนด้วยการไทเทรตแบบไอโซเทอร์มอล (ITC) วิธีการเหล่านี้สามารถบอกเราได้ว่าผู้ตรวจสอบจับกับเซลล์ Tet - 213 ได้แรงเพียงใด
เรายังต้องตรวจสอบความจำเพาะของผู้ตรวจสอบด้วย เราต้องการให้แน่ใจว่าพวกมันจับกับเซลล์ Tet - 213 เท่านั้น ไม่ใช่กับเซลล์ประเภทอื่น เราสามารถทำได้โดยการทดสอบผู้ตรวจสอบกับสายเซลล์ต่างๆ
การใช้งาน Aptamers ที่เลือกจาก Tet - 213 Cells
อุปกรณ์ตรวจสอบที่เราเลือกจากเซลล์ Tet - 213 สามารถใช้งานได้หลากหลาย ตัวอย่างเช่น สามารถใช้ในการตรวจวินิจฉัยได้ เราสามารถติดอุปกรณ์ตรวจสอบเหล่านี้เข้ากับเซ็นเซอร์หรืออุปกรณ์ตรวจจับอื่นๆ ได้ เมื่อมีเซลล์ Tet - 213 ผู้ตรวจสอบจะจับกับเซลล์เหล่านั้น และเซ็นเซอร์สามารถตรวจจับการจับได้ โดยส่งสัญญาณให้เรา
นอกจากนี้ยังสามารถใช้ในการจัดส่งยาแบบกำหนดเป้าหมายได้อีกด้วย เราสามารถติดยาเข้ากับผู้ตรวจสอบได้ เนื่องจากผู้ตรวจสอบมีความสัมพันธ์กับเซลล์ Tet-213 สูง พวกเขาจึงสามารถนำยาไปยังเซลล์เหล่านี้ได้โดยตรง เพิ่มประสิทธิภาพของการรักษาและลดผลข้างเคียง
ข้อควรพิจารณาอื่น ๆ
ในระหว่างกระบวนการคัดกรองแอปทาเมอร์ มีอีกสองสามสิ่งที่เราต้องคำนึงถึง ตัวอย่างเช่น คุณภาพของเซลล์ Tet - 213 เป็นสิ่งสำคัญ หากเซลล์ไม่แข็งแรงหรือมีการปนเปื้อนอาจส่งผลต่อผลการตรวจคัดกรองได้
นอกจากนี้ สภาวะของการคัดกรอง เช่น อุณหภูมิ, pH และองค์ประกอบของบัฟเฟอร์ อาจมีผลกระทบต่อการยึดเกาะของผู้ตรวจสอบกับเซลล์ เราจำเป็นต้องปรับเงื่อนไขเหล่านี้ให้เหมาะสมเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด
เปปไทด์ที่เกี่ยวข้อง
หากคุณสนใจเปปไทด์อื่นๆ ที่เกี่ยวข้อง เราก็มีให้เช่นกันไดนอร์ฟิน เอ (1 - 13), เอไมด์, สุกรและส่วนการเชื่อมต่อ Fibronectin Type III (1 - 25)- เปปไทด์เหล่านี้มีคุณสมบัติและการประยุกต์เฉพาะตัวในการวิจัยทางชีววิทยา
บทสรุป
การคัดกรองแอปทาเมอร์บนเซลล์ Tet - 213 ถือเป็นกระบวนการที่น่าตื่นเต้นและคุ้มค่า อาจนำไปสู่การค้นพบแอปทาเมอร์ที่มีความสัมพันธ์และความจำเพาะสูงกับเซลล์เหล่านี้ ซึ่งสามารถนำมาใช้ในการใช้งานต่างๆ ได้ ในฐานะซัพพลายเออร์เซลล์ Tet - 213 เราพร้อมให้การสนับสนุนคุณในการวิจัยของคุณ หากคุณสนใจซื้อเซลล์ Tet - 213 หรือมีคำถามใดๆ เกี่ยวกับการคัดกรองแอปทาเมอร์ โปรดติดต่อและเริ่มการสนทนาเรื่องการจัดซื้อจัดจ้างได้เลย เรากำลังรอคอยที่จะได้ร่วมงานกับคุณ!
อ้างอิง
- เอลลิงตัน AD และ Szostak เจดับบลิว (1990) การคัดเลือกโมเลกุล RNA ในหลอดทดลองที่จับกับลิแกนด์จำเพาะ ธรรมชาติ, 346(6287), 818 - 822.
- เทิร์ก, ซี. และโกลด์, แอล. (1990) วิวัฒนาการอย่างเป็นระบบของลิแกนด์โดยการเสริมสมรรถนะแบบเอกซ์โปเนนเชียล: ลิแกนด์ RNA ไปจนถึงแบคทีเรีย T4 DNA polymerase วิทยาศาสตร์, 249(4968), 505 - 510.
- Jayasena, SD (1999) Aptamers: กลุ่มโมเลกุลที่เกิดขึ้นใหม่ซึ่งแข่งขันกับแอนติบอดีในการวินิจฉัย เคมีคลินิก 45(9) 1628 - 1650