เฮ้ผู้ที่ชื่นชอบเซลล์เพื่อน! ในฐานะซัพพลายเออร์ของ TET - 213 เซลล์ฉันมีส่วนแบ่งที่ยุติธรรมของประสบการณ์ที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ที่ไม่เหมือนใครเหล่านี้ ในบล็อกนี้ฉันจะแบ่งปันเคล็ดลับเกี่ยวกับวิธีการรักษาความเป็นไปได้ของ TET - 213 เซลล์
ก่อนอื่นเรามาเข้าใจกันว่า TET - 213 เซลล์คืออะไร พวกเขาเป็นประเภทของเซลล์ที่มีศักยภาพที่ยอดเยี่ยมในพื้นที่การวิจัยต่าง ๆ เช่นการศึกษาด้านประสาทวิทยาและการศึกษามะเร็ง แต่การทำให้พวกเขามีชีวิตอยู่และการเตะไม่ใช่การเดินเล่นในสวนสาธารณะเสมอไป
สื่อการเพาะเลี้ยงเซลล์
รากฐานของการบำรุงรักษาเซลล์ใด ๆ เป็นสื่อการเพาะเลี้ยงที่เหมาะสม สำหรับ TET - 213 เซลล์ต้องใช้สื่อที่มีคุณภาพสูง ฉันมักจะแนะนำให้ใช้สื่อที่อุดมไปด้วยสารอาหารที่จำเป็น RPMI 1640 Medium เสริมด้วยซีรั่มของทารกในครรภ์ 10% (FBS), เพนิซิลลินและสเตรปโตมัยซินได้ทำงานอย่างมหัศจรรย์สำหรับฉัน FBS ให้ปัจจัยการเจริญเติบโตและฮอร์โมนที่เซลล์เหล่านี้จำเป็นต้องเจริญเติบโตในขณะที่ยาปฏิชีวนะช่วยป้องกันการปนเปื้อน
ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้จัดเก็บสื่ออย่างถูกต้อง เก็บไว้ที่ 4 ° C และป้องกันจากแสง ก่อนที่จะใช้ให้อุ่นขึ้นถึง 37 ° C ในอ่างน้ำ การเลียนแบบอุณหภูมิของร่างกายและสะดวกสบายมากขึ้นสำหรับเซลล์
เงื่อนไขการฟักตัว
TET - 213 เซลล์ค่อนข้างพิถีพิถันเกี่ยวกับสภาพแวดล้อมของพวกเขา พวกเขาชอบที่จะบ่มที่ 37 ° C ในบรรยากาศที่มีความชื้นด้วย 5% CO₂ สภาพแวดล้อมนี้คล้ายกับสภาพทางสรีรวิทยาในร่างกายมนุษย์อย่างใกล้ชิด
ลงทุนในศูนย์บ่มเพาะที่ดี มันควรมีอุณหภูมิที่มั่นคงและการควบคุมร่วม ตรวจสอบการตั้งค่าและการสอบเทียบของศูนย์บ่มเพาะเป็นประจำเพื่อให้แน่ใจว่าทุกอย่างเป็นไปตามลำดับ นอกจากนี้ทำความสะอาดศูนย์บ่มเพาะเป็นประจำเพื่อป้องกันการสะสมของสารปนเปื้อน
การเพาะเลี้ยงย่อย
การเพาะเลี้ยงย่อยเป็นขั้นตอนสำคัญในการรักษาความมีชีวิตของเซลล์ เมื่อ TET - 213 เซลล์ถึงประมาณ 80 - 90% การบรรจบกันก็ถึงเวลาที่จะแยกพวกเขา ก่อนอื่นให้ถอดสื่อเก่าและล้างเซลล์ด้วยฟอสเฟต - น้ำเกลือบัฟเฟอร์ (PBS) เพื่อกำจัดเศษซากใด ๆ จากนั้นเพิ่มโซลูชัน trypsin - EDTA เพื่อแยกเซลล์ออกจากขวดวัฒนธรรม บ่มขวดที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลาไม่กี่นาทีจนกระทั่งเซลล์เริ่มปัดเศษขึ้นและแยกออก
เมื่อเซลล์ถูกแยกออกแล้วให้เพิ่มสื่อกลางสดใหม่เพื่อทำให้ทริปซินเป็นกลาง หมุนเหวี่ยงเซลล์ช่วงล่างด้วยความเร็วต่ำเพื่อเม็ดเซลล์ กลับมาใหม่เม็ดในตัวกลางที่สดใหม่และถ่ายโอนเซลล์ไปยังขวดวัฒนธรรมใหม่ที่ความหนาแน่นของการเพาะที่เหมาะสม ความหนาแน่นของการเพาะของเซลล์ประมาณ 5 x 10⁴/cm²มักจะทำงานได้ดีสำหรับเซลล์ TET - 213 เซลล์
ตรวจสอบสุขภาพของเซลล์
การตรวจสอบสุขภาพของ TET ของคุณอย่างสม่ำเสมอ - 213 เซลล์เป็นสิ่งสำคัญ ใช้กล้องจุลทรรศน์เฟส - คอนทราสต์เพื่อตรวจสอบสัณฐานวิทยาของเซลล์ Tet Healthy - 213 เซลล์ควรมีรูปร่างที่สม่ำเสมอและดี - ติดกับขวด หากคุณสังเกตเห็นสัญญาณของการตายของเซลล์เช่นเซลล์ลอยหรือรูปร่างของเซลล์ที่ผิดปกติอาจเป็นสัญญาณของปัญหา
นอกจากนี้คุณยังสามารถทำการทดสอบความมีชีวิตได้เช่นการทดสอบการยกเว้น Trypan Blue ผสมเซลล์ระงับเซลล์จำนวนเล็กน้อยกับ Trypan Blue เซลล์ที่มีชีวิตจะไม่รวมสีย้อมในขณะที่เซลล์ที่ตายแล้วจะนำมันขึ้นมาและปรากฏเป็นสีน้ำเงิน นับจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตและตายโดยใช้ hemocytometer เพื่อคำนวณเปอร์เซ็นต์การมีชีวิตของเซลล์
คุณภาพของรีเอเจนต์
การใช้รีเอเจนต์คุณภาพสูงนั้นไม่สามารถต่อรองได้ คุณภาพของ FBS ยาปฏิชีวนะและสารเติมแต่งอื่น ๆ อาจมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อความมีชีวิตของเซลล์ เมื่อเลือก FBS ให้มองหาชุดที่ผ่านการทดสอบความสามารถในการรองรับการเจริญเติบโตของเซลล์ หลีกเลี่ยงการใช้รีเอเจนต์ที่หมดอายุหรือรีเอเจนต์ที่เก็บไว้อย่างไม่ถูกต้อง
ปัจจัยอื่น ๆ ที่ต้องพิจารณาคือเปปไทด์ที่สามารถใช้ร่วมกับเซลล์ TET - 213 เซลล์ ตัวอย่างเช่น,Melanocyte Protein Pmel 17 (130 - 138) (มนุษย์)ได้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการวิจัยบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณเซลล์urechistachininin iและDynorphin A (1 - 17)ยังเป็นเปปไทด์ที่สามารถสำรวจได้ในบริบทของการวิจัยเซลล์ TET - 213
การแก้ไขปัญหา
หากคุณมีปัญหาเกี่ยวกับการรักษาความเป็นไปได้ของ TET - 213 เซลล์อย่าตกใจ นี่คือปัญหาและวิธีแก้ปัญหาที่พบบ่อย:
การปนเปื้อน: หากคุณเห็นสัญญาณของการปนเปื้อนของแบคทีเรียหรือเชื้อราเช่นเมฆมากในอาณานิคมกลางหรือที่มองเห็นได้ทิ้งวัฒนธรรมที่ปนเปื้อนทันที ทำความสะอาดศูนย์บ่มเพาะและอุปกรณ์ทั้งหมดอย่างละเอียด ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ปฏิบัติตามเทคนิคปลอดเชื้อที่เข้มงวดเมื่อจัดการเซลล์
การเจริญเติบโตของเซลล์ที่ไม่ดี: หากเซลล์เติบโตไม่ดีให้ตรวจสอบสื่อการเพาะเลี้ยง อาจเป็นไปได้ว่าสื่อเก่าหรืออาหารเสริมไม่ทำงานอย่างถูกต้อง นอกจากนี้ตรวจสอบให้แน่ใจว่าเงื่อนไขการฟักตัวถูกต้อง บางครั้งการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิหรือความเข้มข้นของCO₂เล็กน้อยอาจส่งผลต่อการเจริญเติบโตของเซลล์
การปลดเซลล์: หากเซลล์แยกออกง่ายเกินไปอาจเป็นเพราะการทริปซิน ลดเวลาฟักตัวของทริปซินในครั้งต่อไป นอกจากนี้ตรวจสอบให้แน่ใจว่าโซลูชัน trypsin - EDTA สดใหม่
โดยสรุปการรักษาความเป็นไปได้ของ TET - 213 เซลล์ต้องใส่ใจในรายละเอียดและความเข้าใจที่ดีเกี่ยวกับความต้องการของพวกเขา โดยทำตามเคล็ดลับเหล่านี้คุณสามารถรักษา TET - 213 เซลล์ให้แข็งแรงและมีประสิทธิผล
หากคุณอยู่ในตลาดสำหรับ TET ที่มีคุณภาพสูง - 213 เซลล์ฉันชอบที่จะคุยกับคุณ ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิจัยที่ทำงานในโครงการขนาดเล็กหรือ บริษัท เทคโนโลยีชีวภาพขนาดใหญ่ฉันสามารถให้เซลล์ที่คุณต้องการได้ ติดต่อเพื่อเริ่มการสนทนาเกี่ยวกับความต้องการของคุณและวิธีที่เราสามารถทำงานร่วมกันได้
การอ้างอิง
- Freshney, RI (2016) วัฒนธรรมของเซลล์สัตว์: คู่มือเทคนิคพื้นฐานและแอพพลิเคชั่นพิเศษ ไวลีย์
- Doyle, A. , & Griffiths, JB (2012) การเพาะเลี้ยงเซลล์และเนื้อเยื่อ: ขั้นตอนห้องปฏิบัติการ Wiley - Blackwell