เฮ้! ในฐานะซัพพลายเออร์ของ TRAP - 14 ฉันมักถูกถามเกี่ยวกับวิธีการสังเคราะห์เปปไทด์นี้ ฉันคิดว่าฉันจะใช้เวลาเพื่อแจกแจงกระบวนการสังเคราะห์ให้กับคุณ
ทำความเข้าใจกับ TRAP - 14
ก่อนอื่น เรามาคุยกันสั้นๆ ว่า TRAP - 14 คืออะไร TRAP ย่อมาจาก Thrombin Receptor Activating Peptide TRAP - 14 เป็นเปปไทด์จำเพาะที่มีสายโซ่ของกรดอะมิโน 14 ชนิด มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นตัวรับทรอมบิน ซึ่งมีความสำคัญในกระบวนการแข็งตัวของเลือดและการทำงานทางสรีรวิทยาอื่นๆ
กระบวนการสังเคราะห์
ขั้นตอนที่ 1: การเลือกกรดอะมิโน
การสังเคราะห์ TRAP - 14 เริ่มต้นด้วยการเลือกกรดอะมิโนที่เหมาะสมอย่างระมัดระวัง เราต้องเลือกกรดอะมิโนคุณภาพสูงที่บริสุทธิ์และปราศจากสารปนเปื้อนใดๆ กรดอะมิโนแต่ละตัวมีคุณสมบัติเฉพาะของตัวเอง และการได้รับกรดอะมิโนที่ถูกต้องเป็นกุญแจสำคัญในการสังเคราะห์เปปไทด์ TRAP - 14 ที่ใช้งานได้ ตัวอย่างเช่น เราต้องแน่ใจว่ากลุ่มป้องกันสายโซ่ด้านข้างของกรดอะมิโนนั้นเหมาะสมกับวิธีการสังเคราะห์ที่เราจะใช้
ขั้นตอนที่ 2: การสังเคราะห์เปปไทด์แบบแข็ง - เฟส (SPPS)
โดยส่วนใหญ่ เราใช้การสังเคราะห์เปปไทด์เฟสของแข็งเพื่อสร้าง TRAP - 14 วิธีการนี้ได้รับการพัฒนาโดย Robert Bruce Merrifield ในปี 1963 และเป็นวิธีเปลี่ยนเกมในการสังเคราะห์เปปไทด์
กระบวนการนี้เริ่มต้นด้วยการติดกรดอะมิโนตัวแรกเข้ากับส่วนรองรับที่เป็นของแข็ง ซึ่งมักจะเป็นเรซิน เรซินเป็นฐานที่มั่นคงสำหรับห่วงโซ่เปปไทด์ที่กำลังเติบโต เมื่อกรดอะมิโนตัวแรกเข้ามาแล้ว เราก็สามารถเริ่มเติมกรดอะมิโนที่เหลือทีละตัวได้
ก่อนที่จะเพิ่มกรดอะมิโนใหม่แต่ละตัว เราจำเป็นต้องเปิดใช้งานก่อน สิ่งนี้เกี่ยวข้องกับการทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์คัปปลิ้ง รีเอเจนต์การมีเพศสัมพันธ์ช่วยสร้างพันธะเปปไทด์ระหว่างกรดอะมิโนใหม่กับสายเปปไทด์ที่กำลังเติบโตบนเรซิน หลังจากปฏิกิริยาคัปปลิ้ง เราจำเป็นต้องล้างรีเอเจนต์และผลพลอยได้ที่ไม่ทำปฏิกิริยาออกไป
สิ่งที่ยอดเยี่ยมอย่างหนึ่งเกี่ยวกับ SPPS คือการทำให้เป็นอัตโนมัติค่อนข้างง่าย เราสามารถใช้เครื่องสังเคราะห์เปปไทด์เพื่อควบคุมการเติมกรดอะมิโน ขั้นตอนการกระตุ้น และขั้นตอนการล้าง ซึ่งไม่เพียงแต่ช่วยเร่งกระบวนการสังเคราะห์เท่านั้น แต่ยังช่วยลดโอกาสที่จะเกิดข้อผิดพลาดจากมนุษย์อีกด้วย
ขั้นตอนที่ 3: การปลดการป้องกัน
หลังจากที่เติมกรดอะมิโนทั้งหมดเพื่อสร้างสายโซ่กรด 14 - อะมิโน - ของ TRAP - 14 แล้ว เราจำเป็นต้องกำจัดกลุ่มป้องกันออก กลุ่มป้องกันเหล่านี้ถูกเพิ่มไว้ก่อนหน้านี้เพื่อป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่พึงประสงค์ในระหว่างกระบวนการสังเคราะห์
การกำจัดการป้องกันมักกระทำโดยใช้กรดแก่ เช่น กรดไตรฟลูออโรอะซิติก (TFA) TFA สามารถทำลายพันธะระหว่างกลุ่มปกป้องและกรดอะมิโนได้ โดยไม่ทำลายสายโซ่เปปไทด์ อย่างไรก็ตาม เราต้องระมัดระวังกับสภาวะของปฏิกิริยา เช่น ความเข้มข้นของ TFA และเวลาของปฏิกิริยา เพื่อหลีกเลี่ยงปฏิกิริยาข้างเคียงใดๆ
ขั้นตอนที่ 4: ความแตกแยกจากเรซิน
เมื่อการยกเลิกการป้องกันเสร็จสมบูรณ์ เราจำเป็นต้องแยกเปปไทด์ TRAP-14 ออกจากเรซิน สิ่งนี้ยังถูกกระทำโดยใช้รีเอเจนต์สำหรับการตัดแยกที่เหมาะสมอีกด้วย หลังจากการแตกแยก เปปไทด์จะถูกปล่อยลงในสารละลาย และสามารถกำจัดเรซินออกได้โดยการกรอง
ขั้นตอนที่ 5: การทำให้บริสุทธิ์
เปปไทด์ TRAP - 14 แบบดิบที่ได้รับหลังจากความแตกแยกจำเป็นต้องได้รับการทำให้บริสุทธิ์ มีวิธีการทำให้บริสุทธิ์หลายวิธีที่เราสามารถใช้ได้ แต่โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) เป็นวิธีการหนึ่งที่พบบ่อยที่สุด
HPLC แยกเปปไทด์ออกจากสิ่งเจือปนที่เหลืออยู่ตามคุณสมบัติทางเคมีที่แตกต่างกัน เราสามารถปรับเฟสเคลื่อนที่และเฟสคงที่ของคอลัมน์ HPLC เพื่อให้เกิดการแยกที่ดีที่สุด หลังจากการทำให้บริสุทธิ์ เราจะได้เปปไทด์ TRAP - 14 ที่มีความบริสุทธิ์สูง
ขั้นตอนที่ 6: การจำแนกลักษณะ
สุดท้าย เราต้องระบุลักษณะเฉพาะของเปปไทด์ TRAP - 14 ที่สังเคราะห์ขึ้นเพื่อให้แน่ใจว่ามีโครงสร้างและคุณสมบัติที่ถูกต้อง เราใช้เทคนิคเช่นแมสสเปกโตรเมทรีเพื่อกำหนดน้ำหนักโมเลกุลของเปปไทด์ หากน้ำหนักโมเลกุลตรงกับค่าที่คาดไว้ ก็เป็นข้อบ่งชี้ที่ดีว่าการสังเคราะห์สำเร็จ นอกจากนี้เรายังสามารถใช้สเปกโตรสโคปีเรโซแนนซ์แม่เหล็กนิวเคลียร์ (NMR) เพื่อยืนยันลำดับกรดอะมิโนและโครงสร้างสามมิติของเปปไทด์
เปรียบเทียบกับเปปไทด์อื่นๆ
การเปรียบเทียบกระบวนการสังเคราะห์ TRAP-14 กับเปปไทด์อื่นๆ เป็นเรื่องที่น่าสนใจ ตัวอย่างเช่น,กับดัก - 5เป็นอีกหนึ่งเปปไทด์ที่กระตุ้นการทำงานของตัวรับทรอมบิน แต่มีกรดอะมิโนเพียง 5 ตัวเท่านั้น โดยทั่วไปการสังเคราะห์ TRAP - 5 จะเร็วและง่ายกว่าเนื่องจากมีกรดอะมิโนให้เติมน้อยกว่า อย่างไรก็ตาม หลักการพื้นฐานของ SPPS ยังคงมีผลบังคับใช้
เปปไทด์อีกชนิดหนึ่งDOTA - E - [c(RGDfK)2]มีโครงสร้างที่ซับซ้อนมากขึ้น ประกอบด้วยเปปไทด์ไซคลิกและสารคีเลต (DOTA) การสังเคราะห์เปปไทด์นี้จำเป็นต้องมีขั้นตอนเพิ่มเติมเพื่อสร้างโครงสร้างวงจรและเพื่อยึดกลุ่ม DOTA
Secretin (หนู)เป็นฮอร์โมนเปปไทด์ การสังเคราะห์ยังเป็นไปตามหลักการทั่วไปของการสังเคราะห์เปปไทด์ แต่ลำดับและข้อกำหนดกิจกรรมทางชีวภาพอาจทำให้เกิดความแตกต่างบางประการในเงื่อนไขการสังเคราะห์และวิธีการทำให้บริสุทธิ์
เหตุใดจึงเลือก TRAP ของเรา - 14
ในฐานะซัพพลายเออร์ เรามีความภาคภูมิใจใน TRAP - 14 คุณภาพสูง เรามีมาตรการควบคุมคุณภาพที่เข้มงวดในทุกขั้นตอนของกระบวนการสังเคราะห์ ทีมผู้เชี่ยวชาญของเรามีประสบการณ์หลายปีในการสังเคราะห์เปปไทด์ ดังนั้นคุณจึงมั่นใจได้ว่า TRAP - 14 ที่คุณได้รับจากเรามีความบริสุทธิ์และใช้งานได้จริง
เรายังเสนอบริการการสังเคราะห์แบบกำหนดเองอีกด้วย หากคุณต้องการ TRAP - 14 เวอร์ชันดัดแปลงหรือเปปไทด์ที่มีลำดับเฉพาะ เราสามารถทำงานร่วมกับคุณเพื่อให้ตรงตามความต้องการของคุณได้
ติดต่อเราเพื่อซื้อ
หากคุณสนใจซื้อ TRAP - 14 หรือมีคำถามใดๆ เกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ของเรา อย่าลังเลที่จะติดต่อเรา เรายินดีเสมอที่จะช่วยเหลือคุณในเรื่องความต้องการเปปไทด์ของคุณ ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิจัยในห้องปฏิบัติการหรือบริษัทที่ทำงานเกี่ยวกับการพัฒนายาใหม่ๆ เราก็สามารถจัดหา TRAP - 14 คุณภาพสูงที่คุณต้องการได้
อ้างอิง
- เมอร์ริฟิลด์, RB (1963) การสังเคราะห์เปปไทด์เฟสของแข็ง I. การสังเคราะห์เตตราเปปไทด์ วารสารสมาคมเคมีอเมริกัน, 85(14), 2149 - 2154.
- ฟิลด์, GB, & Noble, RL (1990) การสังเคราะห์เปปไทด์เฟสของแข็งโดยใช้กรดอะมิโน 9 - ฟลูออเรนิลเมทอกซีคาร์บอนิล วารสารนานาชาติด้านการวิจัยเปปไทด์และโปรตีน, 35(2), 161 - 214